1984年，首次主演电影《今年的湖畔会很冷》，其后签约邵氏电影公司到香港发展。1987年出演电影《倩女幽魂》中聂小倩，并获得当年香港电影金像奖最佳女主角提名；1992年凭《倩女幽魂Ⅲ：道道道》获得第25届西班牙锡切斯奇幻电影节最佳女主角。

　　1994年后王祖贤逐渐淡出影圈，1998年发行了个人国语专辑《与世隔绝》、日语专辑《Angelus》；2004年，王祖贤主演的电影《美丽上海》获得内地第二十四届中国电影金鸡奖最佳故事片奖  ，同年拍完电影《美丽上海》后宣布息影。